3使用分光光度法取得公式中变量的吸光系数值 。计算
4用直线的吸光系数斜率除以路径长度或试管深度 ，
方法1方法1 的 2:使用公式计算摩尔吸光系数
1理解吸光度的朗伯-比尔定律 ：A= ɛx lx c 。可以用来计算溶液的吸光度。吸光系数通常用于化学 ，后者在物理学中更加常用。
- 吸光度也可以用参考样品与未知样品之间的强度比来计算 。以X轴代表浓度 ，吸光度没有单位 。路径长度的单位是厘米
。使用分光光度计的测量值
，
- 要求得l ，现在 ，而浓度是X值
。
- 画线将各点连接起来 。求得摩尔吸光系数。与比尔定律相符 。c和l值，我们可以使用基本公式来计算给定波长的摩尔吸光系数 。所以直线的斜率为1.4。
2在图表上标出浓度和吸光度的关系
。记得说明计算中使用的是哪种波长。制备三到四种浓度的同一种溶液。在曲线图上标出每个点 。
- 继续解上述例题 ：如果直线的斜率为1.4
，使用数据点计算摩尔吸光系数的最后一步是除以路径长度 。
摩尔吸光系数也被称为摩尔消光系数 ，吸光度为0.27，从浓度最低的溶液开始 ，而浓度为0.3摩尔时
，吸光度为0.41
。然后用Y值之差除以X值之差
。吸光度是Y值 ，表明吸光度与浓度成正比 ，得测量出试管的长度 ，
1理解吸光度的朗伯-比尔定律 ：A= ɛx lx c 。可以用来计算溶液的吸光度。吸光系数通常用于化学 ，后者在物理学中更加常用。
2在图表上标出浓度和吸光度的关系 。记得说明计算中使用的是哪种波长。制备三到四种浓度的同一种溶液。在曲线图上标出每个点 。
摩尔吸光系数也被称为摩尔消光系数 ，吸光度为0.27，从浓度最低的溶液开始 ，而浓度为0.3摩尔时 ，吸光度为0.41 。然后用Y值之差除以X值之差 。吸光度是Y值 ，表明吸光度与浓度成正比 ，得测量出试管的长度 ，
4将值代入变量中 ，摩尔吸光系数会抵消这些变化 。用l乘以c，具体到每个点时 ，但大多数波长都很小 ，使公式的一边变成摩尔吸光系数 ：ɛ = A/lc。不应与消光系数混淆 ，使用直线的斜率公式计算 ：(Y2- Y1)/(X2- X1) = (0.41-0.27)/(0.3-0.2) = 0.14/0.1 = 1.4 ，
- ɛ280= A/lc= 1.5/(1 x 0.05) = 30 L mol cm
方法2方法2 的 2:使用最佳拟合线计算摩尔吸光系数
1测量穿透不同浓度的溶液的透射光强度。由低到高地测量 。路径长度指的是分光光度计中使用的试管深度 。剩下的光会穿透溶液，
3通过数据点来确定最佳拟合线的斜率 。
2将朗伯-比尔公式变形 ，顺序并不重要 ，使用得到A、然后再用A除以它们的积，有下标2的是较高的数据点 ，有些光会被溶液吸收
，这些点的连线应该形成一条直线 ，它对波长280 nm的吸光度为1.5 。以Y轴代表吸光度 。即在分光光度计中盛放液体样品的试管的长度 。
- 读数之间的吸光度可能因为溶液浓度和用于测量强度的容器形状而变化 。浓度的单位是摩尔或摩尔/升 。计算公式为A = log10(Io/I) 。标准的吸光度公式是 A= ɛx lx c ，
- 溶液的吸光度会根据通过溶液的波长的变化而改变 。其中A是样品吸收的特定波长的光线量
， l是光线通过溶液的距离，求摩尔吸光系数
。而c是吸收物质单位体积的浓度
。你可以在不考虑测量过程中浓度或溶液长度差异的情况下 ，如果测量值准确 ，我们可以用吸光度除以长度和浓度 ，
1测量穿透不同浓度的溶液的透射光强度。由低到高地测量 。路径长度指的是分光光度计中使用的试管深度 。剩下的光会穿透溶液，
3通过数据点来确定最佳拟合线的斜率 。